サーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアスサーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアス


Top page


スウェルジェル

6XHisタッグ融合タンパク質の精製をしていますか?SwellGelTM Nickel Cheleting Discsを使えば、従来法より短時間、低コストで精製のハイスループット化(HTS)ができます!

特徴/利点:
High-performance。ハイキャパシティーでハイスループット化したシステムが6xHisタッグ融合タンパク質精製の新しいスタンダードです

  • 1ウェルあたり1mg以上の緑色蛍光タンパク質(GFP)を結合できるよりハイキャパシティーを持っています
  • 96ウェルフィルタープレートなのでアフィニティークロマトよりも簡単に融合タンパク質を溶出できます

●あらかじめ、チャージ、平衡化、キレートコーティング済みディスクなのでウェル間の差がありません(図2)

  • Ready-to-useなフォーマットなので、時間とコストが節約できます。乾燥したディスクに溶菌液(lysate)を加え、精製するだけです。
  • 96ウェルプレートにゲルを用意する手間が省けます

●カバーシールをはがしてすぐに使えます

  • サンプルのタンパク質を加えるとディスクが再水和され、60秒以内にニッケル-キレートアガロースがゲル化します(図1)
  • スラリー法よりも簡単に使えます(図2)

●ウェットタイプニッケルキレートアガロースゲルと同様に使えて、操作はより簡単です(図1)

  • GFPを用いた精製では、SwellGelTM Nickel Chelating Discsによるバインディングキャパシティーのロスは認められません

●優れた安定性で、室温で保存ができます

  • 冷蔵庫スペースも節約!他社やご自分で調達されたものと違い、SwellGelTMNickel Chelating Discsは室温保存可能です

スウェルジェルのデータ

ニッケルキレートアガロースゲルのデータ

図1.SwellGelTMNickel Chelating Discsの高いバインディングキャパシティー
250mlのEscherichia Coli. BL21細胞内に発現させた組換え6xHis緑色蛍光タンパク質(GFP)をB-PER®II Bacterial Protein Extraction Reagent(#78260)の5mlを加え て抽出する。細胞残査を取り除いた後、溶解液100μlをニッケルSwellGel®Nickel Chelating Discsの入ったフィルタープレートのウェルまたは通常のニッケル-キレートアガロースゲルに加える。未反応タンパク質を低遠心分離(500g、3min.)により取り除き、250μlのリン酸バッファ−(50 mM Na3PO4, 300 mM NaCl, 80 mM imidazole, pH 7.6)で2回洗浄する。結合した6xHisタッグGFPは溶出バッファ−(50 mM Na3PO4, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 7.6)100μlで溶出する。各ステップに於けるサンプルを回収して、4%-20%濃度勾配 SDS-PAGE にかける。
Panels A:100μlのサンプルで水和させたSwellGel®Nickel Chelating Discs
Panels B:平衡バッファーを除いた後、ニッケルキレートアガロースゲルに100 μlサンプルを添加したもの
Lanes M:BlueRanger® Molecular Weight Marker (#26681);1:flow-through;2-3:washes;4-6:elutions.


図2.
96ウェルフィルタープレートのSwellGel®Nickel-Chelating Discsで精製された6xHisタッグGFP
Escherichia Coli. 細胞溶解液サンプルと核ステップの分画はCCDカメラによって記録した
96ウェルプレートのデータ


Cat # 製 品 名 容 量
75824 SwellGelTM Nickel Chelating Discs in a 96-well sealed plate EACH
89827 SwellGelTM Bulk Nichkel Chelated Discs, 96/Pack EACH

製品情報は掲載時点のものですので、ご覧いただくタイミングにより製品情報が変更されている場合があります。

〒113-0021 東京都文京区本駒込1-27-9
TEL 03-3947-7310 FAX 03-3947-7306
メールはこちらへ info@technochemical.com