テクノロゴ サーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアスサーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアス
アンプル入り ホルムアルデヒド 16%(w/v)溶液
細胞内クロスリンクおよび細胞/組織固定用(メタノール・フリー)
Formaldehyde Ampules, Methanol-free
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10 x 1 ml ampules of 16% formaldehyde solution:アンプル入り ホルムアルデヒド水溶液 メタノール・フリー高純度ホルムアルデヒド溶液は蛋白質:蛋白質や蛋白質:核酸の相互作用検出、バイオイメージング、フローサイトメトリーを目的とする分子間架橋に広く用いられています。パラホルムアルデヒドから直接調製され、不活性雰囲気下でアンプルに封入されます。
16%ホルムアルデヒド水溶液の推奨希釈率と反応液中の典型的濃度
用途 濃度 希釈率 概要
細胞/組織のイメージング
(免疫蛍光染色と電子顕微鏡)
4% 1:04 蛍光標識した特異抗体により、細胞または組織を因子特異的に視覚化
(細胞・組織の固定化)
細胞内/オルガネラ内の架橋
(蛋白質相互作用の解析)
1% 1:16 培養細胞を架橋して蛋白質相互作用複合体を安定化(架橋複合体はウエスタンブロット解析か質量分析
クロマチン免疫沈降
(ChIPアッセイ)
1% 1:16 DNA:蛋白質を核内架橋、DNA断片化、ヒストンまたは転写制御因子蛋白質に対する免疫沈降後、除蛋白を行い、結合DNAを同定・定量する手法
フローサイトメトリー
(FACS analysis)
2% 1:08 細胞特異的な蛍光標識抗体により細胞を標識して、レーザーによりカウントおよびソート(解析前に細胞を固定することで安定化)

メタノール・フリー
ホルムアルデヒドは空気酸化によりギ酸を生じ最終的にパラホルムアルデヒドに再重合します。ホルムアルデヒド溶液には安定化のために10%程度のメタノールが添加されている製品もありますが、メタノールは蛋白質を凝集させることが知られています。従って、殆どのプロトコルでは使用直前にパラホルムアルデヒドからフレッシュなホルムアルデヒド溶液を調製することを推奨しています。
ホルムアルデヒド
ホルムアルデヒドは反応性の高い最小の細胞膜透過性試薬であり細胞内の蛋白質や核酸の可逆的架橋試薬や細胞固定化剤として使用されます。その膜透過性により蛋白質相互作用やバイオイメージングといった生細胞内でのアプリケーションが可能になります。ホルムアルデヒドは分子間または分子内で近接する1級アミン間にメチレン基(-CH2-)を介した可逆的結合を形成、カップリングします。結合は試料を加熱することで切断できます。
Structure of formaldehyde:ホルムアルデヒド構造式
パッケージサイズ
16%ホルムアルデヒド(w/v)溶液はフレッシュでメタノール・フリーなホルムアルデヒドを特に必要とするアプリケーションユーザーを対象とした包装容量になっています。16%(w/v)溶液により希釈を単純化、またアプリケーションに特化した包装容量により無駄を最小化します。
  • 1 mlアンプルはクロマチン免疫沈降(ChIP)や蛋白質相互作用検出など蛋白質ベースの細胞内
    アプリケーションを目的にしています。
  • 10 mlアンプルは画像解析前の培養ディッシュ上での細胞固定などバイオイメージング
    (high content screening/analysis)を目的にしています。

一般的な用途

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  • 細胞/組織の固定と視覚化
  • 細胞内クロスリンク
  • クロマチン免疫沈降 (ChIP assays)
  • フローサイトメトリー
  • In vivo の一過性の相互作用の安定化と検出
  • 膜蛋白質や細胞質蛋白質との複合体解析
  • 架橋後の共免疫沈降 (Co-IP)
  • 架橋複合体のウエスタンブロットと検出

Reference
  1. Kiernan, J.A. (2000). Formaldehyde, formalin, paraformaldhyde and glutaraldehyde: What they are and what they do? Microscopy Today 00-1, 8-12.

関連製品リンク
Photo-Leucine and Photo-Methionine
Cell Lysis Reagents
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 :取扱説明書   :MSDS(英語版)
Cat # 製  品  名 Pkg. Size
28906 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free
16%ホルムアルデヒド水溶液、メタノールフリー
10 x 1ml ampule
28908 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free
16%ホルムアルデヒド水溶液、メタノールフリー
10 x 10ml ampule

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