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GelCode® Blue Stain Reagent
ジェルコード ブルー染色試薬

Western Blotting 等で使用する泳動用ゲルの高感度・短時間染色試薬
GelCode Blue Stain はアクリルアミドゲル内でのCoomassie G-250 によるタンパク質の染色を利用したゲル染色法を原理とします。従来法で要求された有機溶媒による面倒な脱色プロセスに代わる純水洗浄(Water Wash Enhancement)でクリアなバックグランドと高い検出感度を実現しました。
Blue Gel イメージ
水溶性CBB染色のGelCode Blue
E-Zinc Reversible
Phosphoprotein Staining KitやGlycoprotein Staining Kit


特 長
● メタノール/酢酸による脱色ステップが不要
・ 調製時間の節約、試薬コストや有機溶媒廃棄コスト削減
・ 脱色過剰によるロスを回避
● Ready-to-use、75分間の迅速法
・ 染色トレイ中で染色をリアルタイムに確認
・ オーバーナイト染色可能(有意のバックグランド上昇なし)
・ 柔軟なプロトコル(SDS/Native-PAGE染色, メンブレン染色, 電子レンジ迅速染色)
● 従来クーマシー染色法よりも高感度
・ 8 ng までのタンパク質バンドを確認
・ デンシトメーターでの広い線形域 (文献1
・ 転写後の膜染色も可能(取扱説明書プロトコル参照)
・ MALDI-TOF 分析に対応 (文献2,3,4
・ 配列解析に対応 (文献5
● 純水洗浄(オプション)
・ クリスタルクリアなバックグランド
・ 染色強度の低いバンドでも簡単

従来の Coomassie 染色 従来の Coomassie 染色
従来の Coomassie 染色:染色時間: 1 時間 Pierce GelCode Blue Stain:染色時間: 1 時間
染色時間: 1 時間
脱色までバンドは確認不可
染色時間: 1 時間
脱色までバンドは確認不可
従来の Coomassie 染色:メタノール/酢酸中での1時間の脱染色 Pierce GelCode Blue Stain:1時間の純水洗浄(オプション)
メタノール/酢酸中での1時間の脱染色 1時間の純水洗浄(オプション)
透明なバックグランドによる高い感度(8ng

GelCode Blue Staining Protocol

蛋白量
(ng)
Myosin
H鎖
(200 kD)
Phosphorylase
b
(97.4 kD)
BSA
(68 kD)
OVA>
(43 kD)
Carbonic
anhydrase
(29 kD)
Lactoglobulin
(14.3 kD)
Lysozyme
(18.4 kD)
3,000 3.5 5.1 9.4 17.6 10.3 19.5 14.8
2,000 2.7 3.8 7.3 14.2 8.4 16 11.8
1,000 1.6 2 3.6 8 4.9 9.4 7
500 1.3 1.5 2.3 4.7 3.2 5.9 4.4
250 1.3 1.4 1.8 3.1 2.5 3.8 3.1
125 1.3 1.3 1.6 2.5 2.3 2.9 2.6
62.5 1.3 1.3 1.5 2.3 2 2.3 2.3
31.2 1.3 1.3 1.3 1.6 1.7 1.9 2
15.6 1.3 1.3 1.3 1.4 1.6 1.8 1.8
7.8 1.3 1.3 1.3 1.3 1.3 1.4 1.5
各タンパク質を系列希釈して10ulを4-20%グラジエントゲルで泳動した。泳動後のゲルは200mlの超純水による洗浄(3×5分間)後、20 ml の GelCode Blue Stain Reagentによる1時間の染色に供した。Water Wash Enhancement による増感後、ゲルをBio-Rad Molecular Imager GS-700によりスキャンした。データ(Relative Adsorption)はMicrosoft Excelにより処理、同試薬による染色ではタンパク質に依存して異なる線形応答を示すことが判る。
Relative Adsorption 1.3 がバックグランド値となる。

Referens
  1. Mateer, S.C., et al. (2002). J. Biol. Chem. 227, 12324-12333.
  2. Aulak, K.S., et al. (2001). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 12056-12061.
  3. Lim, J., et al. (2002). J. Biol. Chem. 277, 20774-20782.
  4. Hilton, J.M., et al. (2001). J. Biol. Chem. 276, 16341-16347.
  5. Tani, M., et al. (2002). J. Biol. Chem. 275, 3462-3468.

Cat # 製 品 名 Pkg
24590 GelCode® Blue Stain Reagent
SDS-PAGE 8 cm× 10 cm ミニゲルの25枚を染色可能
500 ml
24592 GelCode® Blue Stain Reagent
3.5 liters

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