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PEO/PEG含有架橋試薬トップ
サーモフィッシャーサイエンティフィック ピアスブランドのウェブサイトでは、クロスリンカー選択の為のガイドが有りますのでご利用下さい

Bis(NHS)PEO5 Bis(NHS)PEG5 [Bis N-Succinimidyl-(pentaethyene glycol) ester]

両末端にアミン反応性のNHSエステルを含む水溶性のホモ2価クロスリンカーです。


BM(PEG), bis-maleimide crosslinkers with polyethylene glycol (PEG) spacer arms

Bis(NHS)PEO5 は、従来の硫酸基により水溶性を付与されたアミン反応性のクロスリンカー BS3 (# 21580) のアナログですが、スペーサーに炭化水素鎖を使用したBS3と異なり、架橋後に架橋産物に疎水性を付与することがありません。これはBS3の親水性Sulfo-NHSエステル基が反応後に離脱するのに比べ、親水性のPEG鎖が分子内のスペーサーに含まれているためです。

PEO/PEG スペーサー
この試薬のPEG5(ペンタエチレングリコール)スペーサーは架橋産物の水溶性改善や凝集性の低減のほか in vivo なアプリケーションでの抗原性の低下も特徴として挙げることができます。

特徴
  • アミンを含むタンパク質を親水性のPEGスペーサーを介して架橋
  • NHSエステルが1級アミンを含む分子内または分子間で pH 7-9 で速やかに反応
  • 限定された分子量とスペーサーアーム長
特性
別称: Bis-dPEG-NHS ester, Bis-NHS-PEO and Bis(NHS)dPEG5
組成: C22H32O13N2
分子量: 532.50
スペーサーアーム長: 21.7 Å
目的分子への付加分子量: 302.13(架橋時)
(NHSエステル加水分解による1端のみの反応(single modification)では 320.15が付加)
形状: 粘性液体
溶媒対応: DMSO, methylene chloride
保存条件: 冷凍庫
(-20℃ での脱水乾燥保管:試薬は粘性が高く秤量が困難なため、Dry DMSOなどの有機溶媒に溶解し母液を調製します。母液は不活性ガスで封入したセプタム付きバイアルからのシリンジによる分取が推奨されています。母液は加水分解による失活を避けるため速やかに使用し、調製後の試薬は最長でも3ヶ月以内に全て使い切ることが推奨されています。)
反応基: NHSエステル(反応pH 7.0-9.0、アミンと反応)
スペーサーアーム組成: ポリエチレンオキシド (PEO)/5 エチレンオキシドサブニット
Reference
Hermanson, G.T. (1996). Bioconjugate Techniques, Academic Press ( # 20002)
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Cat.# 製 品 名 容 量
21581 Bis(NHS)PEG5
Bis N-Succinimidyl-(pentaethyene glycol) ester]
100 mg
21582 Bis(NHS)PEG9 100 mg

NHS-PEOn-Maleimide (n=2,4,8,12)
マレイミド基とNHSエステル基を両端に含むPEG含有ヘテロ2価クロスリンカーのシリーズです。

NHS-PEOn-Maleimideの構造式

この4つのヘテロ2価クロスリンカーはアミンとスルフヒドリルに反応する試薬であり、 17.6 Å から 53.4 Å のPEGサブユニットを含むスペーサーアームにより架橋産物を隔てます。

架橋には(アミン反応性の)NHSエステルとの反応が最初に行われ、続いて(スルフヒドリル反応性の)マレイミドとの反応が行われます。したがって架橋されるタンパク質のうち一つにSH基を含んでいる必要があり、分子内のシステインやTraut's Reagent (2-iminothiolane,#26101)SATA (# 26102)により導入されたSH基が利用されます。NHSエステルは1級アミンと pH 7.0-9.0 で共有結合(アミド結合)を形成します。マレイミドはSH基と pH 6.5-7.5 で安定なチオエステル結合を形成します。

二つの反応基を隔てるPEGスペーサーは、従来のSMCCやSulfo-SMCCなどの炭化水素鎖をスペーサーに持つ架橋剤に比べて、架橋産物の水溶性の改善、凝集性の低減などのほかに、 in vivo なアプリケーションでの抗原性の低下などの特徴もあります。
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SM(PEG), NHS ester and maleimide heterobifunctional crosslinkers with polyethylene glycol (PEG) spacer arms
  n = 2
SM(PEG)2
n = 4
SM(PEG)4
n = 6
SM(PEG)6
n = 8
SM(PEG)8
n = 12
SM(PEG)12
n = 24
SM(PEG)24
Molecular weight 425.39 513.50 601.60 689.71 865.92 1394.55
Spacer arm length 17.6 Å 24.6 Å 32.5 Å 39.2 Å 53.4 Å 95.2 Å


特性 NHS-PEG2-Mal NHS-PEG4-Mal NHS-PEG8-Mal NHS-PEG12-Mal
別称 Mal-dPEG2-NHS
NHS-PEG2-Maleimide
Mal-dPEG4-NHS
NHS-PEG4-Maleimide
Mal-dPEG8-NHS
NHS-PEG8-Maleimide
Mal-dPEG12-NHS
NHS-PEG12-Maleimide
組成 C18H23N3O9 C22H31N3O11 C30H47N3O15 C38H63N3O19
分子量 425.39 513.5 689.71 865.92
スペーサー長 17.6 Å 24.6 Å 39.2 Å 53.4 Å
付加分子量 310.12 398.17 574.27 750.38
形状 固体(低融点) 粘性液体 粘性液体 粘性液体
対応溶媒 DMSO,塩化メチレン DMSO,塩化メチレン DMSO,塩化メチレン DMSO,塩化メチレン
保存(*) -20℃, desiccated -20℃, desiccated -20℃, desiccated -20℃, desiccated
反応基 NHSエステル(1級アミンと反応)、マレイミドSHと反応) NHSエステル1級アミンと反応)、マレイミド(SHと反応) NHSエステル(1級アミンと反応)、マレイミドSHと反応) NHSエステル(1級アミンと反応)、マレイミドSHと反応)
スペーサー ポリエチレンオキシド (PEO); 2 エチレンオキシドサブユニット ポリエチレンオキシド (PEO); 4 エチレンオキシドサブユニット ポリエチレンオキシド (PEO); 8 エチレンオキシドサブユニット ポリエチレンオキシド (PEO); 12 エチレンオキシドサブユニット
* Dry DMSOで調製された母液は、適切に保存された場合で最長3ヶ月間安定


Reference
 Hermanson, G.T. (1996). Bioconjugate Techniques, Academic Press (# 20002)
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Cat.# 製 品 名 容 量
22102 NHS-PEG2-Maleimide (Spacer Arm 17.6Å;MW 425.39) 100 mg
22103 NHS-PEG2-Maleimide (Spacer Arm 17.6Å;MW 425.39) 1 g
22104 NHS-PEG4-Maleimide (Spacer Arm 24.6Å;MW 513.50) 100 mg
22105 NHS-PEG6-Maleimide (Spacer Arm 32.5Å;MW 601.60) 100 mg
22107 NHS-PEG4-Maleimide (Spacer Arm 24.6Å;MW 513.50) 1 g
22108 NHS-PEG8-Maleimide (Spacer Arm 39.25Å;MW 425.39) 100 mg
22112 NHS-PEG12-Maleimide (Spacer Arm 53.4Å;MW 865.92) 100 mg
22113 NHS-PEG12-Maleimide (Spacer Arm 53.4Å;MW 865.92) 1 g
22114 NHS-PEG24-Maleimide (Spacer Arm 95.2Å;MW 1394.55) 100 mg



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