サーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアスサーモフィッシャーサイエンティフィック:ピアス
タンパク質抽出試薬
Y-PER® Yeast Protein Extraction Reagent
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バクテリアタンパク質
抽出試薬(B-PER®)		 顆粒体
可溶化試薬		 膜タンパク質
抽出試薬(Mem-PER®)		 培養細胞タンパク質
抽出試薬(M-PER®)		 プロテアーゼ/ホスファターゼ
インヒビター(Halt®シリーズ)
核／細胞質タンパク質
分画試薬(NE-PER®)		 組織タンパク質
抽出試薬(T-PER®)		 昆虫細胞用タンパク質
抽出試薬(I-PER)		 植物タンパク質
抽出試薬(P-PER®)		  

酵母の細胞壁はグルカン・マンナン・キチンを含む多糖（細胞壁グルカン）とタンパク質や脂質からなる複雑で強固な構造体です。酵母からのタンパク質の抽出には、この細胞壁を破砕または分解する必要があり、ガラスビースを併用したフレンチプレスなどの機械的破砕方法、酵素による細胞壁消化とスフェロプラスト化後の浸透圧法があります。ガラスビーズによる抽出は正攻法ではありますが静電的なビーズ吸着やタンパク質との凝集などの問題もあり、また特別な器具も必要とします。酵素法はタンパク質（または構造体）に対するダメージも小さく、今日では頻繁に使用されている方法です。ただ、この方法も酵素消化の前処理としてDTT等の還元剤の添加や、消化後のホモジナイザーによる機械的破砕などは実際には必要であり、またインキュベーション時間やストローク回数の最適化も必要となります。
　サーモフィッシャーサイエンティフィック　ピアスブランドY-PER®シリーズはマイルドな界面活性剤により構成された酵母タンパク質抽出試薬です。細胞壁と細胞膜に部分的に「ヒビ」を入れることで、細胞を可溶化して水溶性タンパク質を抽出します。酵素やホモジナイザーは一切必要とせず、またタンパク質の変性も最小限に抑えることが出来ます。
特徴
  • 抽出は室温で20分（残査除去10分）
  • S. cerevisia (酵母), S .Pombe, Pichia pastoris (酵母), B. subtilis (グラム陽)
    で実証
  • 約2倍の総タンパク質が抽出可能 (ガラスビーズ法と比較)
  • タンパク質の活性維持
    (β-Gal酵素では活性を確認 注：データ未公開)
  • GSTや6ｘHisなどのTag精製に対応
  • 最適回収PHASE（対数増殖期、定常期）や培養培地は取扱説明書に記載
  • TCEP還元剤やプロテアーゼ阻害剤使用可
  • 透析・イオン交換カラムの使用不可
Y-PER抽出とガラスビーズ抽出の比較

Cat # 製　品　名 容 量
78990 Y-PER® Yeast Protein Extraction Reagent 500 ml
78991 Y-PER® Yeast Protein Extraction Reagent 200 ml



Y-PER-Plus Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent
酵母タンパク質抽出試薬 (透析可能)

Y-PER®の特徴を残しつつ、透析可能な組成に変更されたY-PER-PLUS試薬です。
特徴
  • 抽出は室温で20分
  • S. cerevisia (酵母), Pichia pastoris (酵母), B. subtilis (グラム陽), E.coli (グラム陰)で実証
  • 透析による界面活性剤成分の除去が可能
  • 低イオン強度（0.1M以下：イオン交換カラム使用可）
  • Trisベースのバッファー組成（NaClは含まない）
  • BCAやCoomassie Plusによるタンパク質定量が可能
  • 最適回収PHASE（対数増殖期、定常期）や培養培地は取扱説明書に記載
  • 0.1M DTTや20-50mM TCEPの添加による定常期での抽出効率改善も可能（細胞に依存）

Cat # 製　品　名 容 量
78998 Y-PER® Plus, Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent 25 ml
78999 Y-PER® Plus, Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent 100 ml



Y-PER 6×His Fusion Protein Column Purification Kit
6×Hisタグ酵母タンパク質抽出および精製キット

Y-PER®抽出による大量発現6×Hisタンパク質精製に最適化された高キャパシティキットです。
Y-PER®試薬、Niキレートカラム、洗浄・溶出バッファーを含みます。
特徴
  • Y-PER®によるマイルドな抽出
  • カラムあたり平均10mg以上の組み換えタンパク質が精製可能

Cat # 製　品　名 容 量
78994 Y-PER® 6×His Fusion Protein Column Purification Kit
#78991 Y-PERR Yeast Protein Extraction Reagent 200 ml
#78101 Nickel Chelated Columns 5 x 1 ml
#78111 Wash Buffer 1 60 ml
#78120 Wash Buffer 2 60 ml
#78130 Elution Buffer 45 ml
Kit



Y-PER GST Fusion Protein Column Purification Kit
GST融合酵母タンパク質抽出および精製キット

Y-PER®抽出による大量発現GST融合タンパク質精製に最適化された高キャパシティキットです。
Y-PER®試薬、Niキレートカラム、洗浄・溶出バッファーを含みます。
特徴
  • Y-PER®によるマイルドな抽出
  • カラムあたり平均10mg以上の組み換えタンパク質が精製可能

Cat # 製　品　名 容 量
78997 Y-PER® 6×His Fusion Protein Column Purification Kit
#78991 Y-PERR Yeast Protein Extraction Reagent 200 ml
#78250 Immobilized Glutathione Columns
(Capacity: 8 mg horse liver glutathione
S-transferase /column)		 5 x 1 ml
#78257 Wash Buffer 1 60 ml
#78256 Wash Buffer 2 85 ml
#78259 Glutathione 5 x 184mg
Kit



Yeast β-Galactosidase Assay Kit
酵母2ハイブリッド法でのβガラクトシダーゼ活性測定キット

固体培地から直接ピックアップしたコロニーを、Y-PER試薬とアッセイ溶液の等量混合液（反応液）に懸濁して、β-Gal酵素活性を定量（OD660とA420）もしくは定性（目視またはA420）することができます。
特徴
  • Y-PER®によるマイルドで効果的な抽出とONPG加水分解による比色検出
  • 固体培地から直接に定量・定性が可能（スクリーニングに最適）
    注） 一般的にONPGの感度はX-Galの1/100万分とされています。

Cat # 製　品　名 容 量
75768 Yeast β-Galactosidase Assay Kit
Y-PERR Yeast Protein Extraction Reagent 25 ml
Nickel Chelated Columns 5 x 1 ml
2X β-Galactosidase Assay Buffer 25 ml
1M Na2CO3 Stop Solution 25 ml
Kit


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