バクテリアタンパク質 抽出試薬(B-PER®) 顆粒体 可溶化試薬 膜タンパク質 抽出試薬(Mem-PER®) 核／細胞質タンパク質 分画試薬(NE-PER®) プロテアーゼ/ホスファターゼ インヒビター(Halt®シリーズ) 組織タンパク質 抽出試薬(T-PER®) 酵母タンパク質 抽出試薬(Y-PER®) 昆虫細胞用タンパク質 抽出試薬(I-PER) 植物タンパク質 抽出試薬(P-PER®)   エムパー　培養細胞タンパク質抽出試薬 細胞剥離・凍結融解・超音波破砕などの処理を必要としないReady-to-Useな可溶化試薬です。室温での5分間の反応で、凍結融解法の25％、超音波破砕の20％も高い収量が得られます。 またM-PERはマイルドな非イオン性の界面活性剤により構成され、抽出したタンパク質へのダメージを最少に抑えるようにデザインされています。使用されている界面活性剤は透析可能です。 特徴 細胞ライン実績（COS7, NIH3T3, Hepa 1-6, 293, CHO, MDA, MB231, FM2） レポーターアッセイ(Luc, β-Gal, CAT)、キナーゼアッセイ、ELISA、ウェスタンブロット、免疫沈降(Seize Mammalian IP Kit:#45332、#45225ではM-PERライゼートを直接使用)に対応 細胞ラインにより150 mM NaClの添加（可溶化と収率の向上）も可能 プロテアーゼインヒビター(#78415 Halt)添加も可能 細胞ペレットのPBSリンス(フェノールレッド等の洗浄)による収率向上も可能 図1. M-PER 試薬と凍結融解・超音波破砕・他社可溶化バッファーとの比較 100mmプレートで集密培養したCOS-7細胞を10ml PBSで一回洗浄して、1ml PBSと共に剥離、5000rpmで5分間の遠心を行い細胞を回収した。細胞ペレットは0.5ml抽出試薬に懸濁して、それぞれ総タンパク質の抽出を行った。凍結融解サイクルはPBS細胞懸濁液をドライアイス・イソプロパノールバスで10分間凍結させ37℃のウォーターバスで融解した。凍結融解は3回繰り返した。超音波破砕は、Branson Sonifier 450 Sonicatorを使用して細胞懸濁液を50％パルスで2分間行った。M-PER試薬と他社試薬による抽出は、それぞれの細胞懸濁液を5分間攪拌した。細胞残渣は13,000 rpmで5分間の遠心により除去し、上清をBCA法によりタンパク質定量に供した。 図2. 一過性発現させた培養細胞でのM-PER試薬とレポーターアッセイとの適合性 FM2 細胞に、ルシフェラーゼ遺伝子を含むレポーター構造体を導入した。導入した細胞はM-PER®と他社試薬でそれぞれ可溶化、ルシフェラーゼアッセイに使用した。 s-ガラクトシダーゼとCAT (クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ) アッセイはMDA-MB-231 細胞にs-ガラクトシダーゼとCATのレポーター構造物をそれぞれ導入した。導入した細胞はM-PER試薬または凍結融解法によって可溶化、ライセートのs-ガラクトシダーゼ活性とCAT活性を測定した。 Cat # 製　品　名 容 量 78503 M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent 25 ml 78501 M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent 250 ml 78505 M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent 1 L 製品情報は掲載時点のものですので、ご覧いただくタイミングにより製品情報が変更されている場合があります。 〒113-0021 東京都文京区本駒込1-27-9 TEL 03-3947-7310　FAX 03-3947-7306 info@technochemical.com