


培養哺乳動物細胞から40分でミトコンドリアを分画するキットです。多検体の調製に適した試薬ベース(非機械的)のプロトコルと、従来のダウンスホモジナイザーを併用するプロトコルから選択できます。分離されたミトコンドリアは、電気泳動やウエスタンブロット、シグナルトランスダクション、代謝研究などにお使い頂けます。
組織サンプルからのミトコンドリア分画キットはこちら |
プロトコル protocol有り
特徴
- 約40分間、ベンチトップのプロトコル (分画遠心分離は12000×g)
- 試薬ベース法、ダウンス併用法から選択
- ミトコンドリはインタクトな状態で分画
- すぐ使用できる Ready-To-Use な 試薬
- 50回分
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| Figure 1.培養哺乳細胞からのミトコンドリア分離A. 試薬ベース法 B. ダウンスホモジナイザー併用法*精製度が高いミトコンドリアの調製には12,000
x g 遠心分離より、3,000 x g 遠心分離を推奨する。 |

Figure 2. Analysis of mitochondrial integrity. C6細胞から試薬ベース法(AとB)、ダウンスホモジナイザー併用法(CとD)で調製されたミトコンドリアと細胞質の各フラクションをシトクロムC(AとC)とVDAC(BとD)に関してウエスタンブロットを行い、SuperSignal
West Pico 化学発光基質により検出した。シトクロムCはミトコンドリア内膜のタンパク質、VDACはミトコンドリア外膜の膜チャネルタンパク質の1つである。M:
mitochondria, C: cytosol
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Figure 3. 2-D Western blot of superoxide dismutase (Mn-SOD) in isolated
mitochondria. NIH3T3細胞からダウンスホモジナイザー併用法で単離したミトコンドリアを、2次元電気泳動サンプルバッファー(7 M urea, 2 M thiourea,
4% CHAPS, pH 3-10 carrier ampholytes, 50 mM DTT)で再懸濁、等電点電気泳動(pH 3-10 IPG)に続き、8-16%
SDS-PAGE電気泳動に供し、スーパーオキシドジジムスターゼについてウエスタンブロットを行った。 |
| Cat # |
製 品 名 |
Pkg. Size |
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| 89874 |
Pierce Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cell*
50回分
| Mitochondria Isolation Kit Reagent A |
50 ml |
| Mitochondria Isolation Kit Reagent B |
500 ul |
| Mitochondria Isolation Kit Reagent C |
70 ml |
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Kit |
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