サーモフィッシャーサイエンティフィック　ピアスブランドの人気シリーズ Easy-Titer IgG Assay Kits に新しい製品が加わりました。ヒトIgGのFc部位に対して優れた特異性を示します。試薬と混合して測定するだけの簡便なプロトコルは、ヒトIgG抗体の定量に最適です。インタクトなFc部位をもつヒト型IgGおよびキメラIgG 定量用のビーズです。マイクロプレート用の分光光度計による405nmまたは340nmでの測定により、γ鎖特異的な抗体を固定したポリスチレンビーズの分散→凝集に伴う吸光度減少から算出します。定量域 15-250 ng/ml、インキュベーション10分間を含む、計30分間の定量です。 特徴 γ鎖特異抗体によるインタクトなFc部位をもつヒト型IgGおよびキメラIgGの定量 体液・培養上清・腹水等の試料中のヒトIgG (全サブクラス) に関して測定可能 反応時間10分を含む、30分以内の測定が可能（従来ELISA法では数時間が必要） 検出下限: 7.8 ng (Fc fragment)、定量域：15 〜 250 ng/ml、CV値: 5% 図1. Easy-Titer IgG Assayのビーズ凝集原理 Easy-TiterHuman IgG (γ鎖) Kit概要 ヤギ抗ヒトIgG抗体(γ鎖特異抗体)で活性化されたポリスチレンビーズは、分散状態で極大吸収波長（405 nm または 340 nm）における最大の吸光度を示す。 試料中のヒトIgGと接触することでビーズが凝集する。 クラスター化した凝集状態のビーズは分散型に比べ、極大吸収波長における吸光度が低下。 低IgG 濃度→高OD / 高IgG濃度→低OD 吸光度減少はIgG濃度に比例、検量線は試料におけるIgGレベルを正確に定量 * 全てのEasy-Titer IgG Assayキットには同様の原理が採用されています。 図 2. Easy-Titer Human IgG (gamma chain) Assay Kitのプロトコル概要 γ鎖特異性 図3. Easy-Titer Human IgG (γ鎖) Assay Kitの選択性 精製ヒトIgGのFcフラグメント、κ鎖、λ鎖、およびヒトIgMをEasy-Titer希釈バッファーで系列希釈(7.8〜500 ng/ml)した。マイクロプレートリーダーはSpectraMax 250 Microplate Spectrophotometerを使用し、波長405 nmでの吸光度(A405)を測定した。試料は各濃度において3分割、3点で測定された。ヒトκ鎖、ヒトλ鎖、ヒト（IgMの）はキットのγ鎖特異抗体に認識されなかった。ヒトFcは認識され、ヒトγ鎖に対する選択性が示された。 検量線 図4. Easy-Titer Human IgG (γ鎖) Assay Kitによる典型的なヒトIgG 検量線 アフィニティ精製されたヒトIgGに関して、濃度域7.8〜500 ng/mlでの検量線を作製した。ヒトIgGの系列希釈試料は100 μg/mlの母液からEasy-Titerキットの希釈バッファーにより調整された。SpectraMax* 250 Microplate SpectrophotometerによりA405は測定された。なお試料は各濃度において3分割、3点で測定された。 *SpectraMax is a trademark of Molecular Devices. Cat # 製　　品　　名 Pkg. Size 23325 Easy-Titer Human IgG (gamma chain) Assay Kit Sufficient material for 96 individual tests of Human IgG with intact Fc region(29 sample determinations performed in triplicate and one standard curve) Goat Anti-Human IgG (gamma chain) Sensitized Beads 2 ml Easy-Titer Dilution Buffer 30 ml Easy-Titer Blocking Buffer 15 ml Kit 23310 Easy-Titer Human IgG (H+L) Assay Kit Sufficient material for 96 individual determinations(29 sample determinations performed in triplicate and one standard curve) Goat Anti-Human IgG (H+L) Sensitized Beads 2 ml Easy-Titer Dilution Buffer 30 ml Easy-Titer Blocking Buffer 15 ml Kit 関連製品 Cat. # 製　　品　　名 容　量 23300 Easy-Titer Mouse IgG Assay Kit Kit 23305 Easy-Titer Rabbit IgG Assay Kit Kit 31154 Human IgG, Whole Molecule 10 mg 31204 Mouse IgG Whole Molecule 10 mg 31235 Rabbit IgG Whole Molecule 10 mg 15041 Reacti-Bind 96-Well EIA Plates - Corner Notch 100枚 15031 Reacti-Bind 8-Well Strip Plates - Corner Notch 100枚 製品情報は掲載時点のものですので、ご覧いただくタイミングにより製品情報が変更されている場合があります。 〒113-0021 東京都文京区本駒込1-27-9 TEL 03-3947-7310　FAX 03-3947-7306 info@technochemical.com