NH基を含む抗体/タンパク質
 
MicroLink Protein Coupling Kitにより、小スケールでのアフィニティ精製を迅速で簡単に行う事ができます。少量 (25-100 μg) の精製抗体や精製タンパク質をAminoLink
Plusゲルに共有結合的に固相化することで、繰り返し(2-3回程度)使用可能なアフィニティ担体を作成できます。スピンカラムにより洗浄・溶出し、200-300
μlの試料をアフィニティ精製できます。各キットには10回分のカラム作成に必要な試薬と20回分のアフィニティ精製に必要な試薬が含まれます。
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特徴
- 共有結合的に固定化するため、固定した抗体・タンパク質の侵出無し
- 少量 (25-100 μg) の抗体・タンパク質の固定化に最適
- 1級アミンやリジン残基を含むタンパク質とアルデヒド基による共有結合
- スピンカラムによる迅速な洗浄と溶出が可能
- 調製したアフィニティ担体は結合キャパシティの損失なしに2-3 回程度使用可能
- カップリング効率は80%（哺乳動物抗体を室温で4時間反応）以上
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A.
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B.
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図１．GST 融合 BIR2 のMicroLinkによるアフィニティ精製
抗GST 抗体 (87 μg) をAminoLink Plus ゲル にカップリング（架橋化率は87% ）、200 μl の大腸菌ライセートからGST
融合 BIR2のアフィニティ精製を行った。 A.溶出画分は 4-20% Precise Protein Gel (#25204)を用いた SDS-PAGEにより分離し、GelCode
Blue (#24590)によりCBB染色された。Lane 1: 40 μg 大腸菌ライセート、Lanes 2-4: 溶出フラクションの1-3番(各30
μl)、Lane 5: 分子量マーカーBlueRanger Prestained MW Markers (#26681) B.アフィニティ精製されたGST
融合 BIR2 はウエスタンブロット後、抗GST 抗体と化学発光基質 SuperSignal West Dura Chemiluminescent
Substrate* (#34075)により検出された。 Lane 1: 1.2 5 μg大腸菌ライセート、 Lanes 2-4:順に2, 4,
6 μlの溶出フラクション1番、Lane 5: 化学発光用分子量マーカー |
| 関連製品 |
| Cat # |
製 品 名 |
Pkg. Size |
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| 20485 |
MicroLink Peptide Coupling Kit
キットには10回のカップリング反応に充分な試薬類と20回のアフィニティ精製に必要な試薬類が含まれます。 |
Kit |
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| 69715 |
Pierce® Microcentrifuge Tubes, 1.5 ml |
72 nuit |
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| 28372 |
BupH Phosphate Buffered Saline Packs |
40 pcak |
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| 21027 |
Gentle Ag/Ab Elution Buffer |
500 ml |
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| 21004 |
IgG Elution Buffer |
1 L |
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| 24580 |
MemCodeTM Reversible Protein Stain Kit for Nitrocellulose Membranes |
Kit |
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| 88013 |
Nitrocellulose Membrane, 0.2μ, 7.9cm x 10.5cm |
15 枚 |
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